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SYBR Green I是一种可代替溴化乙锭(EB)的新型花青类核酸染料，毒性很低，使用安全。SYBR Green I最低可以检出20pg的double-stranded DNA(dsDNA) (254nm)，灵敏度高于溴化乙锭(EB)检测方法。SYBR Green I还可以用于检测寡核苷酸，灵敏度同样高于EB。在采用琼脂糖电泳或聚丙烯酰胺电泳方法检测dsDNA时，SYBR Green I是最灵敏的荧光染料之一。

SYBR Green I与核酸结合后的最大吸收峰为490nm，另外，在紫外区290nm和380nm处也有吸收峰。在紫外透射光下与核酸结合后呈绿色荧光，最大发射波长为515nm，可使用可见光凝胶透射系统或紫外凝胶透射系统观测。

SYBR Green I用于电泳检测DNA时，既可在电泳前进行染色(预染法)，也可电泳后再进行染色(后染法)。

• 本公司提供的SYBR Green I染料产品溶解于DMSO中，从冰箱取出后应恢复至室温，充分融化并混匀后使用。为了减少损失，开盖请先离心沉积至管底部。
  
• SYBR Green I染料对玻璃和非聚丙烯材料具有一定的亲和力，建议在稀释、储存、染色等使用过程中使用聚丙烯类容器。
  
• SYBR Green I检测single-strand DNA (ssDNA)和RNA时，其灵敏度有所下降。
  
• 采用常规用酒精沉淀核酸的操作即可将全部的SYBR Green I染料从双链核酸上去掉。
  
• SYBR Green I的致突变性明显比EB低得多，目前尚无关于SYBR Green I染料对人体的致突变性或毒性的数据，但仍是一种潜在的诱变剂，请注意防护。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套和口罩操作。
  
• 本制品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

• 预染法：
  
  • 制胶：根据需要配制适当浓度(0.8～3.0%)的琼脂糖胶液。在琼脂糖完全融解后，适当冷却但未凝固时，按照每100mL胶液加入10μL SYBR Green I的比例(10,000:1)加入SYBR Green I。混匀后即可把琼脂糖胶液倒入制备凝胶的模具中。
    
  • 样品、Marker预染：将SYBR Green I与6×Loading Buffer按照1:9的比例混合(如5μL的染料与45μL的6×Loading Buffer混合)，获得Loading Buffer预染液。将核酸样品和Marker分别与Loading Buffer预染液按5:1的比例混合，室温孵育3min左右。
    
    • 含有SDS的Loading Buffer会影响电泳结果，建议使用不含SDS的Loading Buffer。
      
    • 由于SYBR Green I灵敏度高，核酸样品量较大时可能会使条带分不清，所以建议品质较好的Marker和浓度较高的样品可以适当稀释后使用(一般2μL配制好的Loading Buffer预染液对DNA的有效承载量为100～500ng)。
  • 按常规方法上样电泳，电泳结束后即可在紫外或蓝光照射下观察。
• 后染法：
  
  • 按照常规方法进行电泳，不需要在制胶时加SYBR Green I。
    
  • 用pH7.5～8.0的缓冲液(例如TAE、TBE或TE)，按照一定比例稀释SYBR Green I (琼脂糖凝胶电泳按1:10000或2:10000的比例稀释；聚丙烯凝胶电泳按3:10000或4:10000的比例稀释)，轻轻震荡混匀，即成染色液。染色液一周内，避光低温储存应至少可用4次。
    
  • 将凝胶完全浸入染色液中，室温避光震荡染色30～60min。染色时间根据胶浓度及厚度确定，凝胶越厚或浓度越高，所需的染色时间越长。
    
  • 染色结束后即可直接在紫外或蓝光照射下观察。